黄芪多糖中的主要有效成份是多糖和黄芪苷。黄芪苷分为黄芪苷Ⅰ、黄芪苷Ⅱ、黄芪苷Ⅳ。其中生物活性最好的是黄芪苷IV即黄
4006-054-001 立即咨询发布时间:2022-10-09 23:05 热度:
【摘要】 黄芪多糖中的主要有效成份是多糖和黄芪苷。黄芪苷分为黄芪苷Ⅰ、黄芪苷Ⅱ、黄芪苷Ⅳ。其中生物活性最好的是黄芪苷IV即黄芪甲苷。
【关键词】 芪红胶囊;黄芪甲苷;高效液相色谱,
黄芪甲苷不仅具有黄芪多糖的作用,还有些是黄芪多糖无法比拟的作用,其药效强度是常规黄芪多糖的2倍多,抗病毒作用更是黄芪多糖的30倍。由于含量少,效果好,更是有“超级黄芪多糖”之称。
芪红胶囊是由黄芪、红花,冰片、桃仁等多味药材制成的中药复方制剂,具有活血化淤、通络止痛的功效,临床主要用于治疗冠心病(气虚血淤型),疗效确切。方中黄芪是芪红胶囊的君药,其药用有效成分主要是黄芪甲苷(astragaloside IV)。为了控制药品的质量,本文选择黄芪甲苷作为含量测定指标,建立HPLC?ELSD法分离测定芪红胶囊中黄芪甲苷含量的方法,为中药芪红胶囊的质量标准研究提供依据。
目的 建立芪红胶囊中黄芪甲苷的含量测定方法,为芪红胶囊质量标准的研究提供依据。方法 采用HPLC法分离并测定了中药芪红胶囊中黄芪甲苷的含量。色谱条件:Diamnosil C18柱(460 mm×250 mm,5 μm),以乙腈?水(体积比35∶65)为流动相;蒸发光散射检测器(ELSD)。 结果:此方法线性为2.53~15.18 μg,平均加样回收率为99.4%。结论 本方法精密度高,分离度良好,可用于中药芪红胶囊中黄芪甲苷的含量测定。
本篇论文发表在《》 杂志是中华人民共和国卫生部主管,海峡两岸医药卫生交流协会与二十一世纪联合创新(北京)医药科学研究院主办的国家级综合性医药专业学术期刊,全国人大副委员长桑国卫为本刊亲笔题写了刊名并担任名誉总编。
1仪器与试药
1.1仪器Waters 600E泵高效液相色谱仪,Waters M32色谱工作站;SEDEX 55蒸发光散射检测器(法国)(漂移管温度60 ℃,增溢为7,气压2.1×105 Pa);Mettler AE240(十万分之一)天平(梅特勒-托利多上海仪器有限公司);SYZ?A石英亚沸高纯水蒸馏器(江苏信达仪器厂)。
1.2试药黄芪甲苷(中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用,批号:0781?200301);乙腈(色谱纯, Tedia Company, Inc., Fairfield, OH,USA);芪红胶囊(广州鑫升科技公司提供,规格:0.4 g/粒,批号:20060307,20060308,20060309)。
2方法与结果
2.1色谱条件的选择 Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm) (迪马公司产) 为色谱柱;乙腈?水(体积比35∶65)为流动相;柱温:30 ℃;流速1.0 mL/min;SEDEX 55蒸发光散射检测器(漂移管温度60 ℃,增溢为7,气压2.1×105 Pa)。在此色谱条件下,黄芪甲苷与样品中其他组分分离良好,理论板数按黄芪甲苷色谱峰计大于3 000。色谱图见图1、2。
2.2对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品12.65 mg,置25 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
2.3供试品溶液的制备精密称取样品8 g,加水50 mL使溶解,转移至分液漏斗中,用水饱和的正丁醇提取5次,每次30 mL,合并正丁醇液,以氨试液洗涤5次,每次20 mL,弃去氨试液,合并正丁醇液,蒸干,残渣用甲醇溶解并转移至5 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,作为供试品溶液。
2.4线性关系考察分别精密吸取上述对照品溶液5、10、15、20、30 μL,注入液相色谱仪,照上述色谱条件测定黄芪甲苷峰面积,以对照品进样量(m) 自然对数为横坐标、峰面积值(A) 自然对数为纵坐标,绘制标准曲线,测定结果表明,黄芪甲苷对照品在进样量2.53~15.18 μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为:A=1.521 0m+10.666 2,r=0.999 7。
3讨 论
3.1供试品溶液的制备由于黄芪甲苷类成分在正丁醇中的溶解度比较大,因此选用正丁醇进行提取,经回收试验证明方法可行。作者曾试验采用未经氨试液处理的供试品溶液进行测定,含量大大偏低,故供试品溶液经氨试液处理才能进行含量测定。
3.2检测器的选择黄芪甲苷的含量测定法有薄层扫描法[1~3],紫外检测的HPLC法[4]及HPLC?ELSD法[5~6],由于薄层扫描法对黄芪甲苷的含量测定结果误差大,紫外检测的HPLC法则选择203 nm的末端吸收波长来测定,其误差也很大,故目前专家建议采用HPLC?ELSD法测定,此方法减少了误差,满足了含量测定的要求,故本文也选择蒸发光散射检测器。
3.3流动相的选择HPLC测定选择了乙腈?水(体积比35∶65),乙腈?水(体积比30∶70),甲醇?水(体积比35∶65)几种流动相体系,通过比较分离情况,确定了上述体系,该体系使各成分得到了较好的分离,满足定量的要求。
黄芪甲苷可特异性和非特异性的排除侵入肌体的异物,对特异、免疫和非特异性免疫均有促进作用,提高机体的抗病能力。能促进机体抗体的生成,可使抗体形成细胞数和溶血测定值显著增强。黄芪甲苷能显著提高球虫免疫鸡的淋巴细胞转化水平和E—玫瑰花环形成率,是单核—巨噬细胞系统的有效激活剂。黄芪甲苷还可以提高氧化作用,提高免疫器官中GSH-PX、SOD活性,提高免疫防御和免疫监视功能。
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